Sephadex色谱分离的原理主要基于 分子筛和扩散两种机制。

分子筛效应：

Sephadex是由葡聚糖交联而成的一种多孔性颗粒材料，具有均匀的孔径和良好的机械稳定性。在柱色谱分离过程中，样品溶液被泵入装有葡聚糖凝胶颗粒的柱中。由于凝胶颗粒的网状结构，样品中的分子根据其大小和形状在凝胶颗粒中以不同的方式移动。小分子可以通过凝胶颗粒的孔隙自由移动，因此可以在较短的时间内洗脱出来；大分子由于无法进入凝胶颗粒内部，只能沿着凝胶颗粒之间的间隙移动，因此洗脱时间较长。

扩散效应：

分子在凝胶颗粒中的运动不仅受分子大小影响，还受扩散系数的影响。扩散系数大的分子能够更快地穿过凝胶颗粒，从而在较短的时间内洗脱出来。

通过控制洗脱条件（如洗脱液的性质、流速等），可以实现对不同大小分子的分离。

此外，Sephadex还可以在由极性与非极性溶剂组成的混合溶剂中进行分离，其原理主要是分子筛和正相分配色谱。

综上所述，Sephadex色谱分离原理主要是利用其三维网状结构中的分子筛效应和扩散效应来实现对不同大小分子的分离。这种技术广泛应用于生物化学和分子生物学研究中，具有分离容量大、回收率高、副反应少等优点。