高效液相色谱仪的基本操作流程如下:
准备工作
校准仪器:使用一系列标准物质进行校准,确保仪器性能和精密度。
柱温控制:根据分析要求设定柱温。
泵调试:检查泵的抽真空度和流量稳定性。
色谱柱稳定性检查:确保色谱柱内各部分稳定。
色谱柱装载
清洗色谱柱:去除柱内有机物,保证液体稳定性。
安装色谱柱:确保安装紧固,避免柱管损坏。
组装液体系统:确保所有部件密封,避免压力泄漏。
液相色谱仪系统调试
开机:通电启动计算机系统和液相色谱仪的电子控制系统。
程序设定:根据检测要求设定相应程序。
操作程序
开机前的准备:选择合适的色谱柱,配制流动相并进行过滤,超声脱气30分钟。
开机:检查电路连接,启动仪器各部件。
方法编辑:在工作站中设定泵、检测器、柱温箱等参数,并保存方法。
运行:选择走样方法,进行样品进样,监控色谱图谱变化,记录实验数据。
结束操作
关闭液相色谱仪:先关计算机,再关液相色谱仪。
清洗柱子、移流相和进样器等设备,妥善存放未使用的溶液。
注意事项
流动相需过滤,常用的孔径为0.22um(液质)和0.45um(液相)。
压力不宜过大,一般不要超过2000 psi。
所有过柱子的液体均需严格过滤。
新流动相使用前需冲洗泵和进样阀。
柱子非常脆弱,第一次使用的分析方法应避免液体过柱子。
通过以上步骤,可以确保高效液相色谱仪的正确操作和实验数据的准确性。
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