酵母菌的分离与鉴定方法主要包括以下步骤：

培养基的选择与制备

富集培养基：如葡萄糖50g/L、尿素1g/L、（NH4）2SO41g/L、KH2PO42.5g/L、Na2HPO40.5g/L、MgSO41g/L、FeSO40.1g/L、酵母膏0.5g/L、孟加拉红0.03g/L，pH4.5-5.0。

分离培养基：如乳酸-马铃薯-葡萄糖培养基、麦芽汁培养基等，根据具体需求调整成分和pH值。

集菌与初步分离

将样品制成菌悬液，按常规法分离。若需分离特定种类，可进行集菌处理，如加酸性含糖培养基、酸性豆汁等，并在25-28℃下培养2-3天，通过镜检挑去菌丝体，取沉淀酵母进行移植和进一步分离。

筛选与分离

取集菌液适当稀释，吸取一定量接种到培养基上，培养后观察菌落形态，选择符合酵母菌特征的菌落进行进一步分离和纯化。

形态学鉴定

通过观察菌落的大小、形状、颜色、边缘整齐度等特征进行初步鉴定。

分子生物学鉴定

提取酵母菌的DNA，进行PCR扩增，特别是26S rRNA基因的扩增，通过琼脂糖凝胶电泳检查PCR产物，并进行序列分析与系统发育树构建，以确认酵母菌的种属。

生化鉴定

进行发酵特性、风味特征等生化实验，以辅助鉴定。

最终鉴定

综合形态学、分子生物学和生化鉴定的结果，确定酵母菌的具体种属。

建议在实际操作中，根据具体需求和实验条件选择合适的培养基和方法，以确保酵母菌的有效分离和准确鉴定。