一、常用活细胞核染色染料
Hoechst 33342 - 特点:
非嵌入式荧光染料,可穿透活细胞膜,在AT序列富集的DNA小沟处结合,对细胞毒性较低。
- 应用:主要用于早期凋亡细胞的检测,推荐用于活细胞染色;固定细胞时可用Hoechst 33258。
DAPI(4,6-二甲基联苯胺) - 特点:
通用细胞核染料,可染活细胞和死细胞,但荧光强度低于Hoechst,稳定性较高。
- 应用:常用于细胞凋亡检测(与Annexin-V-FITC联合使用)及常规核染色。
SYTO™ 深红色核酸染料 - 特点:
细胞可透过性染料,专用于活细胞、死细胞或固定细胞的核染色,发出深红色荧光。
- 应用:兼容多种荧光成像技术,包括流式细胞仪检测。
二、其他相关染料
Ethidium Homodimer-1 (EthD-1):与DNA结合后发出红色荧光,用于检测死细胞或解体细胞中的核酸。
PI(碘化丙啶):穿透死细胞膜,与DNA结合呈红色,常与Annexin-V-FITC联合用于凋亡检测。
三、选择建议
早期凋亡检测:优先选择Hoechst 33342或DAPI。
常规核染色:Hoechst 33258(固定细胞)或SYTO™(活细胞)。
多参数分析:结合EthD-1与钙黄绿素AM实现活死细胞双染。
四、注意事项
荧光干扰:Hoechst可能影响共聚焦显微镜其他荧光信号的观察,建议使用激光配置。
毒性考量:Hoechst 33342毒性较低,适合长期活细胞染色;EthD-1需避免进入活细胞。