动物细胞的培养限制有以下特殊要求：
专业技能要求高
动物细胞培养需要无菌条件、训练有素的人员和昂贵的设备。操作人员必须具备扎实的生物学知识和熟练的实验技能，否则容易导致培养失败。
量的问题
动物细胞培养生产的单克隆抗体（MAB）和重组蛋白量较少，而下游加工提取纯产品的费用大大增加。与微生物发酵相比，动物细胞培养的产量相对较低，难以满足大规模生产的需求。
去分化和选择
在培养物中细胞连续生长一段时间后，细胞特性可能会发生变化，导致去分化，与原始菌株相比产生差异化的特性。此外，细胞在培养过程中可能会发生筛选现象，失去原始细胞的一些生物学特性。
细胞的起源
不同来源的细胞在培养过程中可能会表现出不同的特性和局限性。例如，新生牛血清、小牛血清和胎牛血清在成分和质量上存在差异，对细胞生长的影响也不同。
污染风险高
支原体和病毒感染难以检测，且具有高度传染性。一旦发生污染，可能会导致整个培养过程失败。
培养环境要求严格
动物细胞培养对培养环境要求苛刻，如适宜的pH、温度、渗透压等。培养箱中CO₂浓度不正确、碳酸氢钠浓度不合适等都可能影响细胞生长。此外，培养基中成分的稳定性也会影响细胞培养，如谷氨酰胺在溶液中不稳定，需特殊保存。
代谢产物的影响
氨离子、乳酸、甲基乙二醛等代谢产物的积累会抑制细胞生长。
血清
动物细胞离体培养常常需要血清。常用的是小牛血清，血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。
支持物
大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃、塑料等作为支持物。
气体交换
二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，不断维持所需要的气体条件。蛋白酶处理时间不宜过长。
无菌、无毒的环境
对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。
营养物质
无机物（无机盐、微量元素等）、有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）。
温度和pH
适宜的温度（36.5±0.5℃）和pH（7.2~7.4）。
气体环境
95%的空气（O₂）和5%的CO₂的混合气体。
这些特殊要求使得动物细胞培养在技术和操作上具有挑战性，需要高度专业的知识和精细化的管理。
